什么是條件媒體?
培養(yǎng)的細胞通常需要添加特定的生長因子以實現(xiàn)增殖、分化或存活。然而,一些重組蛋白的使用成本昂貴。這要么是因為它們難以制造(因此成本高昂),要么是因為它們需要大量。
生產(chǎn)純化重組蛋白的大部分成本是純化步驟。然而,如果重組蛋白由生產(chǎn)細胞分泌到周圍介質(zhì)中,則可以避免純化。為了使細胞培養(yǎng)變得經(jīng)濟實惠,許多研究人員選擇通過將培養(yǎng)基與生產(chǎn)細胞一起孵育,將這些重組蛋白直接添加到細胞培養(yǎng)基中。在用生長因子調(diào)節(jié)培養(yǎng)基后,可以立即將其儲存或轉(zhuǎn)移到需要它的感興趣的細胞上。這種含有細胞分泌的成分且另一組細胞需要的成分的培養(yǎng)基稱為條件培養(yǎng)基。
Wnt-3a 和 R-Spondin 1 經(jīng)常通過調(diào)節(jié)添加到培養(yǎng)基中。重組 Wnt-3a 很難制備,因此價格昂貴。 R-Spondin 1 并不昂貴,但細胞培養(yǎng)中通常需要高濃度 (0.5-1.0 ug/ml),這意味著需要大量使用。
考慮到經(jīng)濟上可行的重組蛋白替代品,花費數(shù)小時培養(yǎng)細胞和分析條件培養(yǎng)基的科學家可能會改變選擇。此外,使用這種方法增加了另一個變量,因為用于調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的細胞會將代謝物分泌到培養(yǎng)基中并耗盡營養(yǎng)物質(zhì)。實際上,接受培養(yǎng)基的細胞正在獲得二手培養(yǎng)基,盡管分泌的生長因子有所改善。
那么有沒有更好的解決方案呢?增長因子成本的部分驅(qū)動因素是浪費。添加到培養(yǎng)基中的大部分生長因子在到達細胞之前就會降解。對于 3D 培養(yǎng)物來說,這個問題尤其嚴重,因為細胞被保存在水凝膠中,生長因子無法有效遷移。在 CellGS,我們一直與美國、歐洲和亞洲的實驗室合作,研究 PODS的使用 ,以提供更低成本、更有效的條件培養(yǎng)基替代品。
PODS在細胞附近緩慢釋放蛋白質(zhì),從而減少了需要添加的生長因子的頻率,并使可用性曲線變平,減少了細胞的壓力,從而提高了細胞的質(zhì)量。