選擇適當?shù)募毎囵B(yǎng)基是細胞培養(yǎng)中非常重要的步驟,它會影響細胞的生長速率、狀態(tài)和實驗結(jié)果。
1.首先參考文獻和廠家建議:
查閱ATCC(American Type Culture Collection)或相關(guān)文獻,了解以前研究同一或相似細胞系的人所使用的培養(yǎng)基和條件。細胞及細胞培養(yǎng)物廠商提供的說明都是有用的參考資料。
2.根據(jù)細胞類型和實驗需求:
常規(guī)來說,培養(yǎng)基均需要添加10-15%血清(一般為胎牛血清)以提供蛋白,部分生長因子,維生素及其他輔助物質(zhì)。以促進細胞生長、維持表型。非無菌室的細胞房應(yīng)常規(guī)添加抗生素。
某些細胞可能需要特殊培養(yǎng)條件,以滿足其特殊的要求。如原代B細胞需要添加LPS以激活,神經(jīng)細胞培養(yǎng)常需添加B-27等。
也可基于實驗改變培養(yǎng)條件,如轉(zhuǎn)染細胞或細胞同步化時常使用減血清培養(yǎng)基opti-MEM。
3.進行試驗性培養(yǎng):
采用此類培養(yǎng)或更換培養(yǎng)條件時(如換血清),建議進行試驗性培養(yǎng),以確定所選培養(yǎng)組分是否適用于您的細胞。
讓我們幫助您選擇胎牛血清
0501金牌胎牛——推薦用于原代胚胎干細胞、iPSC、T細胞、B細胞等
0502特級胎牛——推薦用于原代成纖維、巨噬細胞、T細胞等
0503優(yōu)級胎牛——推薦用于常見細胞系、腫瘤細胞,工具細胞等
盡管胎牛血清在細胞培養(yǎng)中有許多重要作用,但也需注意一些潛在的問題。例如,由于血清的來源和制備過程,可能存在批次間差異,導(dǎo)致實驗結(jié)果難以重復(fù)/產(chǎn)物不穩(wěn)定。澳范擁有穩(wěn)定的血源和產(chǎn)能,盡量避免了批次效應(yīng)的產(chǎn)生。
細胞培養(yǎng)進階--原代細胞系培養(yǎng)是細胞培養(yǎng)中最常規(guī)的環(huán)節(jié),而細胞從來源又可分為細胞系和原代細胞。從培養(yǎng)系統(tǒng)又可分為常規(guī)培養(yǎng)及3D/基質(zhì)培養(yǎng)系統(tǒng)。不同組織來源細胞所需培養(yǎng)體系差別較大。
目前可提供的原代培養(yǎng)技術(shù)支持(維持培養(yǎng)與接種部分有不同):
序號 | 細胞種類 | 推薦添加劑 |
1 | 角質(zhì)形成細胞 | BPE、人表皮生長因子、皮質(zhì)醇、IGF-1、轉(zhuǎn)鐵蛋白等 |
2 | 黑色素細胞 | 堿性成纖維細胞生長因子、BPE、肝素、皮質(zhì)醇、IGF-1、轉(zhuǎn)鐵蛋白、佛波醇12-肉豆蔻酸酯13-乙酸酯等 |
3 | 成纖維細胞 | 堿性成纖維細胞生長因子、肝素、皮質(zhì)醇和表皮生長因子等 |
4 | 大血管內(nèi)皮細胞 | 堿性成纖維細胞生長因子、肝素、皮質(zhì)醇、表皮生長因子和抗壞血酸等 |
5 | 平滑肌細胞 | 堿性成纖維細胞生長因子、表皮生長因子、肝素、IGF-1和BSA等 |
6 | 骨骼肌成肌細胞 | 胰島素、EGF、FGF等 |
7 | 乳腺上皮細胞 | EGF、皮質(zhì)醇、異丙腎上腺素、轉(zhuǎn)鐵蛋白、胰島素,BPE等 |
8 | 肝細胞 | 地塞米松、胰島素、轉(zhuǎn)鐵蛋白、硒復(fù)合物、BSA和亞油酸等 |
9 | 神經(jīng)細胞/干細胞 | 需要依據(jù)細胞亞型 |