凱氏定氮法是測定某些有機(jī)化合物中三陰性態(tài)氮的分析方法。該方法由丹麥化學(xué)家Johan Kjeldahl于1883年開發(fā)，廣泛用于食品中蛋白質(zhì)的測定，因?yàn)榈鞍踪|(zhì)是由含氮氨基酸連接在一起組成的大分子。當(dāng)用于蛋白質(zhì)測定時(shí)，通過使用適當(dāng)?shù)臄?shù)字因子將測量的氮百分比轉(zhuǎn)換為當(dāng)量蛋白質(zhì)含量。對于肉類樣品，該系數(shù)為 6.25，因?yàn)槿忸惖鞍踪|(zhì)大約含有 16% 的氮。凱氏定氮法不直接檢測NN和NO鍵（例如疊氮化物、硝酸鹽、亞硝酸鹽、硝基等）。含有這些基團(tuán)的樣品在凱氏定氮分析之前必須進(jìn)行預(yù)處理或置于還原條件下。當(dāng)樣品中的有機(jī)物質(zhì)被沸騰的濃硫酸消化破壞時(shí)，樣品中的氨基氮轉(zhuǎn)化為硫酸氫銨。添加硫酸鉀以提高混合物的沸點(diǎn)，從而加速分解。必須根據(jù)樣品中存在的有機(jī)物質(zhì)的量來控制硫酸和硫酸鉀的用量，以確保維持 370 - 400°C 的適當(dāng)消解溫度范圍。溫度過低可能會(huì)導(dǎo)致消化時(shí)間過長和/或消化不全，而硫酸鉀與硫酸的比例過高可能會(huì)使溫度升高到 400°C 以上，導(dǎo)致氮熱解損失和結(jié)果較低。還添加金屬催化劑以加速消化。在過去，汞是用于此目的的催化劑，但出于安全和環(huán)境原因，現(xiàn)在更常用銅和硒催化劑。

樣品消化完成后，將過量的氫氧化鈉添加到消化混合物中以中和剩余的硫酸并釋放含氮分子分解時(shí)形成的氨。然后將氨蒸餾成過量的標(biāo)準(zhǔn)酸，并用標(biāo)準(zhǔn)堿反滴定過量的酸。作為替代方案，可以將氨蒸餾到硼酸溶液中，然后可以通過用標(biāo)準(zhǔn)酸直接滴定來測定氨。氨也可以通過比色法（例如，通過與酚鹽離子反應(yīng)）或通過使用氨選擇性電極來測定。在這些情況下，使用標(biāo)準(zhǔn)無機(jī)酸作為氨吸收劑。如果使用汞或汞鹽作為催化劑，硫代硫酸鹽或硫化物與氫氧化鈉一起添加以分解任何汞-銨復(fù)合物，從而釋放出氨并沉淀汞化合物，這可能會(huì)干擾氨的蒸餾。將鋅粒、浮石或其他合適的沸石添加到蒸餾燒瓶中以防止“暴沸"，“暴沸"可能會(huì)由于除氨之外還殘留一些苛性堿而導(dǎo)致錯(cuò)誤結(jié)果。如果氨被硼酸溶液吸收后，直接用標(biāo)準(zhǔn)酸滴定，可以使用甲基紅、甲基紫或溴甲酚綠-甲基紅混合指示劑作為指示劑。如果使用過量的標(biāo)準(zhǔn)酸作為氨的吸收劑，這些指示劑還可用于使用標(biāo)準(zhǔn)氫氧化鈉的反滴定。從而釋放氨并沉淀汞化合物，汞化合物可能干擾氨的蒸餾。將鋅粒、浮石或其他合適的沸石添加到蒸餾燒瓶中以防止“暴沸"，“暴沸"可能會(huì)由于除了氨之外還殘留一些苛性堿而導(dǎo)致錯(cuò)誤結(jié)果。如果氨被硼酸溶液吸收后，直接用標(biāo)準(zhǔn)酸滴定，可以使用甲基紅、甲基紫或溴甲酚綠-甲基紅混合指示劑作為指示劑。如果使用過量的標(biāo)準(zhǔn)酸作為氨的吸收劑，這些指示劑也可用于使用標(biāo)準(zhǔn)氫氧化鈉的反滴定。從而釋放氨并沉淀汞化合物，汞化合物可能干擾氨的蒸餾。將鋅粒、浮石或其他合適的沸石添加到蒸餾燒瓶中以防止“暴沸"，“暴沸"可能會(huì)由于除了氨之外還殘留一些苛性堿而導(dǎo)致錯(cuò)誤結(jié)果。如果氨被硼酸溶液吸收后，直接用標(biāo)準(zhǔn)酸滴定，可以使用甲基紅、甲基紫或溴甲酚綠-甲基紅混合指示劑作為指示劑。如果使用過量的標(biāo)準(zhǔn)酸作為氨的吸收劑，這些指示劑也可用于使用標(biāo)準(zhǔn)氫氧化鈉的反滴定。將浮石或其他合適的沸石添加到蒸餾燒瓶中以防止“暴沸"，“暴沸"可能會(huì)由于除氨之外還殘留一些苛性堿而導(dǎo)致錯(cuò)誤結(jié)果。如果氨被硼酸溶液吸收后，直接用標(biāo)準(zhǔn)酸滴定，可以使用甲基紅、甲基紫或溴甲酚綠-甲基紅混合指示劑作為指示劑。如果使用過量的標(biāo)準(zhǔn)酸作為氨的吸收劑，這些指示劑也可用于使用標(biāo)準(zhǔn)氫氧化鈉的反滴定。將浮石或其他合適的沸石添加到蒸餾燒瓶中以防止“暴沸"，“暴沸"可能會(huì)由于除氨之外還殘留一些苛性堿而導(dǎo)致錯(cuò)誤結(jié)果。如果氨被硼酸溶液吸收后，直接用標(biāo)準(zhǔn)酸滴定，可以使用甲基紅、甲基紫或溴甲酚綠-甲基紅混合指示劑作為指示劑。如果使用過量的標(biāo)準(zhǔn)酸作為氨的吸收劑，這些指示劑還可用于使用標(biāo)準(zhǔn)氫氧化鈉的反滴定。直接用標(biāo)準(zhǔn)酸滴定，可以使用甲基紅、甲基紫或溴甲酚綠-甲基紅混合指示劑作為指示劑。如果使用過量的標(biāo)準(zhǔn)酸作為氨的吸收劑，這些指示劑還可用于使用標(biāo)準(zhǔn)氫氧化鈉的反滴定。直接用標(biāo)準(zhǔn)酸滴定，可以使用甲基紅、甲基紫或溴甲酚綠-甲基紅混合指示劑作為指示劑。如果使用過量的標(biāo)準(zhǔn)酸作為氨的吸收劑，這些指示劑還可用于使用標(biāo)準(zhǔn)氫氧化鈉的反滴定。

所涉及的反應(yīng)可總結(jié)如下：

RICCA CHEMICAL COMPANY 擁有凱氏定氮分析所需的所有吸收劑、中和劑、滴定劑和指示劑，以及酚鹽比色測定或氨選擇電極法所需的試劑。