對于細(xì)胞學(xué)染色,您實(shí)際上是在三種蘇木精染色中選擇一種:Gill 1X hematoxylin,Gill 2X hematoxylin,以及Harris Hematoxylin, Acidified。以下是如何為您的細(xì)胞學(xué)染色選擇最佳蘇木精,以及實(shí)驗(yàn)室技術(shù)人員為兩種最常見的染色選擇的方案。
許多人根據(jù)被分析樣本的類型進(jìn)行選擇。這里,我們列出了每種蘇木精的最佳使用案例。
識別細(xì)胞學(xué)標(biāo)本中的癌細(xì)胞、感染、炎癥或其他細(xì)胞異常
通常,漸進(jìn)吉爾氏蘇木精*適合用于評估細(xì)胞學(xué)標(biāo)本。常見的是,我們推薦Gill 1X,因?yàn)樗徽J(rèn)為是Gill蘇木精染色中*輕的一種。它可以補(bǔ)充OG和EA染色,而不會過度染色標(biāo)本。偶爾,我們會看到Gill 2X蘇木精是正確的選擇,例如當(dāng)您分析癌細(xì)胞、感染或其他細(xì)胞異常的細(xì)胞學(xué)標(biāo)本時。這很大程度上取決于你的病理學(xué)家的偏好;如果她或他喜歡更暗的紫色染色,Gill 2X蘇木精將是*好的選擇。
哈里斯蘇木精,酸化也常用于細(xì)胞學(xué)染色,可逐步使用,以產(chǎn)生可接受的結(jié)果。與Gill的1X蘇木精相比,這將產(chǎn)生更深的染色。
可以參見,“如何設(shè)置和進(jìn)行H&E染色"。"
Gynecological 巴氏涂片和非Gynecological 細(xì)胞學(xué)標(biāo)本
細(xì)胞學(xué)標(biāo)本,例如巴氏涂片或支氣管沖洗/刷,通常從Gill 1X蘇木精染色中獲益最大。這種漸進(jìn)性染色是一種淺紫色,與方案中的OG和EA染色互補(bǔ),不會過度染色標(biāo)本。很少有比這種標(biāo)本類型所需的1倍鰓蘇木精更強(qiáng)烈的染色。
細(xì)胞學(xué)用吉爾氏1X和2X蘇木精染色方案
- 在95%乙醇中固定細(xì)胞學(xué)涂片:15分鐘
- 在去離子水中輕輕沖洗:30秒
- 蘇木精溶液染色,鰓1X或鰓2X: 1至3分鐘
- 在去離子水中輕輕沖洗:1分鐘
- 發(fā)藍(lán)試劑:15至60秒
- 在去離子水中輕輕沖洗:30秒
- 95%乙醇:10次浸泡
- 巴氏染色OG-6: 1至2分鐘
- 試劑酒精,95%: 10次浸泡
- 巴氏染色EA 50或巴氏染色EA 65 EA: 2至3分鐘
注:數(shù)字表示染料的比例。
GYNECOLOGICAL 標(biāo)本用EA 50和用于非GYNECOLOGICAL 樣品的EA 65。
- 乙醇95%,兩次變化:每次10滴
- 100%乙醇,兩次變化:每次1分鐘
- 二甲苯或二甲苯替代品,兩次更換:每次1分鐘
- 使用丙烯酸固定介質(zhì)的蓋玻片,并在顯微鏡下檢查
如果您在處理細(xì)胞學(xué)和組織學(xué)標(biāo)本的實(shí)驗(yàn)室工作,那么您可能需要考慮使用多種染色劑:例如,Gill 1X蘇木精(用于細(xì)胞學(xué))和Gill 1X蘇木精或Harris(用于組織學(xué))。根據(jù)這些指南,確定您的病理學(xué)家的偏好,并選擇適合需要的染色劑。