細(xì)胞計(jì)數(shù)儀使用了液體透鏡的技術(shù),和傳統(tǒng)的機(jī)械透鏡不同,該技術(shù)無(wú)需硬件的移動(dòng)而是通過(guò)電壓的變化來(lái)改變Z軸的位置,不會(huì)產(chǎn)生噪音,而且更加的耐用。該產(chǎn)品可用于PBMC、原代細(xì)胞、酵母細(xì)胞等的細(xì)胞計(jì)數(shù)和活細(xì)胞比例計(jì)算以及GFP轉(zhuǎn)染效率評(píng)估,可以提供更加準(zhǔn)確的結(jié)果。
為了保證后續(xù)實(shí)驗(yàn)的細(xì)胞品質(zhì),許多實(shí)驗(yàn)室會(huì)對(duì)細(xì)胞的濃度和活率進(jìn)行檢測(cè),傳統(tǒng)的方法是通過(guò)針對(duì)哺乳動(dòng)物細(xì)胞的臺(tái)盼藍(lán)染料,針對(duì)酵母的美蘭染料。兩種染料都是染色細(xì)胞核的,當(dāng)細(xì)胞存活時(shí),膜具有選擇透過(guò)性,染料無(wú)法進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)。當(dāng)細(xì)胞死亡后,膜的選擇透過(guò)性失去,染料便可以進(jìn)入細(xì)胞核將細(xì)胞染色。從而區(qū)分出細(xì)胞的死活。
以下是關(guān)于細(xì)胞計(jì)數(shù)儀的常見(jiàn)問(wèn)題介紹,希望能幫助到大家更好的了解本產(chǎn)品。
1、計(jì)數(shù)儀(貨號(hào)為6749)可計(jì)數(shù)的細(xì)胞大小和濃度范圍是多少
可計(jì)數(shù)的細(xì)胞大小范圍為4~70μm,細(xì)胞濃度范圍為5x104~1.0x107細(xì)胞/mL。
2、計(jì)數(shù)儀能否對(duì)外周血單核細(xì)胞(PBMC)進(jìn)行計(jì)數(shù)?
可以。PBMC細(xì)胞大小約7-8μm,符合計(jì)數(shù)儀的計(jì)數(shù)范圍。在對(duì)PBMC計(jì)數(shù)時(shí),需要注意避免碎片等非細(xì)胞雜質(zhì)被識(shí)別成死細(xì)胞從而影響結(jié)果,因此準(zhǔn)確對(duì)焦非常重要。死細(xì)胞在對(duì)準(zhǔn)焦后呈現(xiàn)出實(shí)心黑點(diǎn)的樣子。
3、如何更好地對(duì)焦,從而確保計(jì)數(shù)準(zhǔn)確?
為了準(zhǔn)確地計(jì)數(shù)分析,需要確保對(duì)焦準(zhǔn)確。通過(guò)聚焦旋鈕多次順時(shí)針或逆時(shí)針旋轉(zhuǎn),并且可以進(jìn)一步放大圖像觀察,能夠看到活細(xì)胞有明亮的中心和清晰的邊緣。
4、細(xì)胞計(jì)數(shù)儀能否對(duì)活細(xì)胞和死細(xì)胞進(jìn)行區(qū)分?
可以。通過(guò)細(xì)胞懸液與臺(tái)盼藍(lán)1:1混合,臺(tái)盼藍(lán)會(huì)將死細(xì)胞染成深藍(lán)色,而活細(xì)胞則不被臺(tái)盼藍(lán)染色。將混合液加入計(jì)數(shù)板中計(jì)數(shù)時(shí),在軟件頁(yè)面選擇“trypanblue,yes(1:1)”,計(jì)數(shù)儀會(huì)自動(dòng)分析死活細(xì)胞的數(shù)量及比例,并將結(jié)果直接展示在結(jié)果區(qū),該結(jié)果無(wú)需再乘以2。