Caprico Biotechnologies流式細(xì)胞抗體的實(shí)驗(yàn)分析
更新時間:2023-02-17 點(diǎn)擊次數(shù):1515
Caprico Biotechnologies流式細(xì)胞抗體是用于流式細(xì)胞儀檢測的抗體。盡管我們利用散射光信號可大致區(qū)分細(xì)胞群,但利用熒光標(biāo)記抗體進(jìn)行免疫表型分析可以更準(zhǔn)確地鑒定細(xì)胞亞型。當(dāng)抗體與特異性表面抗原或細(xì)胞內(nèi)抗原結(jié)合后,可以同時對各種抗原進(jìn)行定量分析,以區(qū)分不同細(xì)胞亞群。
流式細(xì)胞術(shù)是一種對液流中排成單列的細(xì)胞或其它生物微粒(如微球,細(xì)菌,小型模式生物等)逐個進(jìn)行快速定量分析和分選的技術(shù),可用于分析細(xì)胞表面和胞內(nèi)分子的表達(dá),在異質(zhì)細(xì)胞群體中表征和定義不同的細(xì)胞類型以及評估分離的亞群純度并分析細(xì)胞大小和體積,允許同時對單個細(xì)胞進(jìn)行多參數(shù)分析。
染色過程涉及從細(xì)胞培養(yǎng)物或組織樣品中制備單細(xì)胞懸液,然后將細(xì)胞與未標(biāo)記或熒光染料標(biāo)記的抗體在管或微量滴定板中溫育,并在流式細(xì)胞儀上進(jìn)行分析。流式細(xì)胞術(shù)的功能決定了其在免疫學(xué)基礎(chǔ)研究中的廣泛應(yīng)用,目前在臨床上主要用于細(xì)胞表型分析、造血系腫瘤診斷和分型、移植前配型及與免疫有關(guān)疾病分析等。
Caprico Biotechnologies流式細(xì)胞抗體實(shí)驗(yàn)和其他抗體相關(guān)實(shí)驗(yàn)有點(diǎn)不同的就是需要選擇同型對照。同型對照是用于消除由于抗體非特異性結(jié)合到細(xì)胞表面而產(chǎn)生的背景染色,相當(dāng)于實(shí)驗(yàn)的陰性對照。
正確使用對照可以避免出現(xiàn)假陽性或假陰性結(jié)果,并且有助于分析實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。推薦使用以下對照:
.未染色細(xì)胞以評估自發(fā)熒光;
.同型對照評估抗體Fc段與靶細(xì)胞結(jié)合(例如:B細(xì)胞、樹突細(xì)胞、單核細(xì)胞);
.內(nèi)部/生物學(xué)陰性對照,評估抗體的非特異性染色(例如:未刺激對比受刺激);
.熒光減一對照(FMO)評估其他熒光染料的干擾和補(bǔ)償本底。